胸膜肺炎放线杆菌apxlIC7kanr＋基因缺失减毒株的构建

• 作者: 余慧 张明 文心田 曹三杰 李建 都启晶 黄小波
• 来源期刊: 中国兽药杂志
• 学科: 农学
• 关键词: 胸膜肺炎放线杆菌 重组转移载体 电转化 突变株 基因工程弱毒活疫苗
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 微生物与免疫
• 页码范围: 5-9
• 页数: 5页
• 分类号: S858.28
• 字数: 2091字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-1280.2012.03.003

摘要

重组转移载体pBSKA通过电转化导入亲本菌胸膜肺炎放线杆菌血清7型（APP-7）WF83株，电转化后的产物涂布于TSB／Kan平板，2d获得突变株。卡那霉素抗性实验证实突变株有卡那霉素抗性；NAD依赖性实验证实突变株依赖NAD生长；PCR鉴定证实了卡那霉素抗性基因置换了apxlIC基因，并证实突变株中无pBSKA质粒的存在；溶血活性实验证实突变株完全失去了溶血活性；细胞毒性实验证实突变株的细胞毒性完全丧失；对小鼠的安全性实验证实突变株的毒力显著减弱，突变株对小鼠是安全的；遗传稳定性实验证实，突变株在体外连续传30代和在体内传10代均不会发生卡那霉素抗性的丢失。结果表明实验成功构建了基因缺失减毒株，为进一步以此突变株作为基因工程弱毒活疫苗株开展研究奠定了一定的基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	文心田		100	612	14.0	19.0
2	曹三杰		89	524	12.0	17.0
3	张明		49	249	9.0	13.0
4	黄小波		52	188	9.0	11.0
5	李建		28	44	3.0	5.0
6	都启晶		5	19	3.0	4.0
7	余慧		3	8	1.0	2.0