无乳链球菌（Streptococcus agalactiae）三重PCR快速检测方法的建立与应用

• 作者: 付希 刘贝贝 汪开毓 王均 王浩丞 肖丹 黄凌远 黄锦炉
• 来源期刊: 海洋与湖沼
• 学科: 生物学
• 关键词: 无乳链球菌 三重PCR 检测方法
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 页码范围: 254-261
• 分类号: Q7
• 语种: 中文

摘要

参照GenBank发表的无乳链球菌sip、cpsE这两个高度保守基因设计两组特异性引物，应用已报道的无乳链球菌cp止基因高度保守序列的引物作为阳性对照引物，经反应条件和反应体系参数优化，建立一种检测无乳链球菌的三重PCR方法，并应用本三重PCR方法检测40尾人工感染罗非鱼样本和22尾临床上收集的疑似无乳链球菌感染鱼样本。结果表明，所建立的三重PCR方法具有良好特异性，检测无乳链球菌DNA样本时出现三条扩增条带，检测其他7种供试菌株DNA则不出现出任何扩增条带，对无乳链球菌DNA样本的最低检测浓度为0．32ng／gl，最适Mg2＋浓度为37．5mmol／L，整个检测过程耗时100min左右。40尾人工感染罗非鱼的肝脏、肾脏组织DNA样本阳性检出率分别为100％，22尾疑似无乳链球菌感染鱼的肝脏、肾脏组织DNA样本阳性检出率分别为72．7％，以上两批样本检测结果与常规细菌鉴定方法结果一致。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄凌远	四川农业大学鱼病研究中心	13	53	5.0	7.0
2	黄锦炉	四川农业大学鱼病研究中心	26	235	9.0	14.0
3	王均	四川农业大学鱼病研究中心	24	94	5.0	9.0
4	肖丹		29	186	6.0	12.0
5	刘贝贝	四川农业大学鱼病研究中心	1	16	1.0	1.0
6	付希	四川农业大学鱼病研究中心	1	16	1.0	1.0
7	王浩丞	四川农业大学鱼病研究中心	1	16	1.0	1.0