抗人CD25嵌合抗体的稳定表达及鉴定

• 作者: 张爱华 杨晓明 胡迪超
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: CD25 嵌合抗体 表达 鉴定
• 年，卷（期）: 2012,（12）
• 所属期刊栏目: 免疫学技术与方法
• 页码范围: 1115-1119
• 页数: 5页
• 分类号: R392.12
• 字数: 3975字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2012.12.013

摘要

目的:构建抗人CD25嵌合抗体稳定细胞株,并对表达产物进行相关鉴定.方法:构建CD25嵌合抗体稳定表达质粒VEC-VTacH和3.3-VTacL并稳定转染CHO-DHFR-细胞,经选择性培养、有限稀释法克隆和MTX加压选择后扩大培养构建的工程细胞,Protein A纯化回收目的抗体后分别进行质谱分析、蛋白质N端测序和平衡解离常数(Kd)的测定.结果:CD25嵌合抗体稳定细胞株的抗体表达水平约为3.74~7.07 μg/ml,质谱分析结果表明其含有鼠源成分和人源成分,蛋白质N端测序表明其与亲本抗体N端序列完全一致,其Kd为2.35×10-10 mol/L,而亲本抗体的Kd为1.88×10-10 mol/L.结论:抗人CD25嵌合抗体保留了亲本抗体的抗原结合活性和亲和力.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张爱华		38	127	6.0	8.0
2	杨晓明		32	129	6.0	8.0
3	胡迪超		9	24	3.0	4.0