新型抗ErbB2、抗CD16三价双特异性抗体的构建及功能鉴定

• 作者: 于鸣 施明 沈倍奋 王明丽 胡美茹 解志刚 郭宁 陆寒 马远方
• 来源期刊: 西安交通大学学报（医学版）
• 关键词: 双特异性抗体 ErbB2 CD16 肿瘤免疫治疗
• 年，卷（期）: 2008,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 489-495
• 页数: 7页
• 分类号: R392.11
• 语种: 中文

摘要

目的 构建一种新型三价抗ErbB2、抗CD16 BsAb.方法 构建重组载体pET22b(+)/BsAb;转化大肠杆菌BL21(DE3),获得重组蛋白的表达,通过包涵体复性纯化蛋白.应用悬浮培养系统扩增稳定表达抗人CD16 scFv-Fc融合蛋白的CHO细胞株(CG5细胞)和稳定表达抗人ErbB2 scFv-Fc融合蛋白的CHO细胞株(HG2细胞),通过rProtein A Sepharose Fast Flow亲和层析柱纯化融合蛋白,应用流式细胞术分析BsAb的结合能力.结果 该BsAb可在大肠杆菌BL21(DE3)中以包涵体形式高效表达,通过对重组蛋白的复性可获得高纯度的蛋白;复性后的BsAb具有与其亲本抗体相似性的结合靶抗原的能力.结论 新型三价抗ErbB2、抗CD16 BsAb能与高表达ErbB2的乳腺癌细胞系SKBR3细胞高亲和力结合和表达CD16的人外周血单个核细胞低亲和力结合.