抗人p185erbB2人-鼠嵌合抗体真核表达载体的构建表达及活性测定

• 作者: 刘文斌 吴健 姜北海 孟麟 寿成超
• 来源期刊: 北京大学学报医学版
• 关键词: p185erbB2 单克隆抗体 嵌合抗体
• 年，卷（期）: 2004,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 491-495
• 页数: 5页
• 分类号: Q813.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1671-167X.2004.05.010

摘要

目的:HER2/neu过度表达见于多种恶性肿瘤.作为肿瘤抗原,p185erbB2是一个理想的肿瘤治疗靶点.本实验在既往工作基础上,构建嵌合型抗p185erB2单克隆抗体(单抗)的真核表达载体,并在CHO-dhfr-细胞中表达,从而降低鼠源性抗体的免疫原性,为进一步的应用研究奠定基础.方法:RT-PCR扩增p185erbB2单抗1-2的轻、重链可变区基因,插入嵌合抗体真核表达载体pWSD2中,脂质体转染CHO-dhfr-细胞.经RT-PCR、间接ELISA、Western blot检测人-鼠嵌合抗体的表达水平,用ELISA、免疫沉淀方法对嵌合抗体的亲和力和特异性进行初步鉴定.此外,采用MTT比色法检测嵌合抗体对高表达p185erbB2的乳腺癌细胞系SKBR3的生长抑制作用.结果:用RT-PCR、间接ELISA、Western blot方法证明人-鼠嵌合抗体在CHO-dhfr-细胞中表达;ELISA检测提示嵌合抗体与高表达p185erbB2的细胞反应阳性,与低表达p185erbB2的细胞反应阴性;免疫沉淀结果表明嵌合抗体可与p185erbB2分子特异性结合;MTT比色法检测表明嵌合抗体对过表达p185erbB2的乳腺癌细胞SKBR3的生长有抑制作用.结论:CHO-dhfr-细胞表达的人-鼠嵌合抗体可与p185erbB2特异性结合,并可抑制高表达p185erbB2的肿瘤细胞生长,表明抗人p185erbB2人-鼠嵌合抗体具有肿瘤生物治疗的潜在应用价值.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	寿成超		2	11	2.0	2.0
2	姜北海		1	2	1.0	1.0
3	刘文斌		1	2	1.0	1.0
4	孟麟		1	2	1.0	1.0
5	吴健		1	2	1.0	1.0