重组SRH融合蛋白工程菌发酵的工艺研究

• 作者: 付文亮 刘深 徐东刚 徐涛 王圆圆 王旻 邹民吉
• 来源期刊: 医学研究杂志
• 关键词: SRH融合蛋白 工程菌发酵 条件优化
• 年，卷（期）: 2012,（11）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 18-21
• 页数: 4页
• 字数: 3350字
• 语种: 中文

摘要

目的 通过对影响表达SRH融合蛋白工程菌发酵的主要因素的研究,建立适宜SRH融合蛋白工程菌的发酵工艺.方法 通过对发酵过程中的pH、溶氧调控、诱导温度、诱导时机及诱导时间进行优化建立SRH蛋白的发酵工艺,利用SDS-PAGE电泳分析表达情况.进一步利用离子交换和凝胶过滤层析对目的蛋白进行纯化,并对纯化后目的蛋白的溶栓活性和抗凝活性进行检测.结果 优化后发酵条件为:发酵pH为7.0、溶氧为45％、菌体浓度达到OD600=8时开始诱导,诱导温度为41℃,诱导时间为4.5h.该发酵条件下得菌量为25g/L.SRH蛋白表达量为45％,并且90％以上为可溶性表达,纯化后蛋白纯度达95％以上,纯品SRH蛋白溶栓活性为1.80×104AU/mg,抗凝活性为100AU/mg.结论 建立了SRH融合蛋白工程菌稳定的发酵工艺,该条件下SRH工程菌发酵蛋白表达量较高,多为可溶性表达,且杂蛋白较少,发酵产物具有生物学活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邹民吉	军事医学科学院基础医学研究所	39	238	6.0	14.0
2	徐东刚	军事医学科学院基础医学研究所	75	421	10.0	17.0
3	刘深	军事医学科学院基础医学研究所	8	147	3.0	8.0
4	徐涛	军事医学科学院基础医学研究所	13	151	3.0	12.0
5	王旻	军事医学科学院基础医学研究所	7	12	2.0	3.0
6	付文亮	军事医学科学院基础医学研究所	9	14	2.0	3.0
7	王圆圆	军事医学科学院基础医学研究所	2	6	1.0	2.0