人羊水来源c-kit+与c-kit-间充质干细胞生物学特征及体外心肌诱导分化能力的比较

• 作者: 刘丽凤 王一茹 王禹 白静 苏绍萍 陈杰
• 来源期刊: 中华老年多器官疾病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: c-kit 羊水 间充质干细胞 心肌 细胞分化
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 294-300
• 分类号: R329.2
• 字数: 5686字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1264.2012.00074

摘要

目的 比较人羊水来源c-kit+与c-kit-间充质干细胞的生物学特征及体外心肌分化能力.方法 通过常规产前诊断或自愿引产,以羊膜腔穿刺术获取14份孕中期羊水(15～31周),通过流式细胞仪分选c-kit+间充质干细胞,比较c-kit+干细胞与c-kit-干细胞的细胞形态及生长曲线.流式细胞仪及免疫细胞化学分析对两种细胞进行表型鉴定,比较其体外向成骨、成脂及心肌样细胞诱导分化能力.RT-PCR和Weston blot检测相关基因及蛋白的表达.结果 14份羊水标本中,有5份标本可以分选到c-kit+羊水干细胞,分布在孕16～22周,分选的细胞数量占贴壁细胞的(3.30±1.24)％.羊水干细胞以成纤维状为主,可以稳定传代,体外培养可增殖到50代以上.经过c-kit分选后,细胞呈均匀一致的长纤维状,排列规律.C-kit+及c -kit-羊水干细胞具有相似的生长曲线.两种细胞均具有间充质干细胞特征,表达间充质干细胞标记( CD29,CD44,CD73,CD90,CD105),不表达造血细胞系标记(CD34,CD45),表达Ⅰ类人类组织相容性抗原(HLA-ABC),不表达Ⅱ类人类组织相容性抗原(HLA-DR).Oct-4及SSEA-4胚胎干细胞标记在c-kit+干细胞的表达比率明显高于c-kit-干细胞.两种细胞在体外均可以向成脂细胞、成骨细胞分化.成脂细胞诱导后,可以看到细胞内脂滴聚集,油红O染色阳性.成骨细胞诱导后,可以看到钙盐沉积,Von Kossa染色阳性.两种细胞分别与新生乳鼠心肌共培养,体外向心肌细胞诱导,c-kit+羊水干细胞可以检测到GATA-4,α-actin,Cx43和cTnT基因及蛋白的表达.而c-kit-干细胞在诱导后只表达GATA-4的基因及蛋白.结论 羊水来源c-kit+及c-kit-干细胞均表达间充质干细胞表型特征,体外可以向成脂、成骨细胞分化.然而,c-kit+干细胞的心肌样细胞分化能力明显强于c-kit干细胞,可能与c-kit+干细胞具有某些胚胎干细胞特征有关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王禹	解放军总医院老年心血管病研究所	131	610	14.0	19.0
2	苏绍萍	解放军总医院第九诊室	21	114	7.0	9.0
3	王一茹	解放军总医院老年心血管病研究所	20	30	4.0	5.0
4	白静	解放军总医院第一附属医院心内科	46	162	8.0	10.0
5	陈杰	解放军总医院老年心血管病研究所	14	23	3.0	4.0
6	刘丽凤	解放军总医院老年心血管病研究所	15	66	5.0	8.0