重组补体因子B-小干扰RNA抑制大鼠脉络膜新生血管形成的作用及其机制

• 作者: 修贺明 姚会娟 尚庆丽 杨爱琴 马景学 马诚 高建
• 来源期刊: 中华实验眼科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 脉络膜新生血管/治疗 基因疗法 补体因子B 小干扰核糖核酸
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 320-325
• 分类号: R-33
• 字数: 6022字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.2095-0160.2012.04.009

摘要

背景 脉络膜新生血管(CNV)是眼内新生血管的重要表现形式.研究发现补体旁路途径的激活在激光诱导的CNV发展中起关键作用,旁路途径中的补体因子B(CFB)可以作为一个重要的靶点来阻断补体活化的旁路途径. 目的 探讨不同浓度重组CFB-siRNA(CFB-siRNA)抑制激光诱导大鼠CNV的效果及其作用机制.方法 取棕色挪威(BN)大鼠60只120只眼,采用随机数字表法将其分为空白对照组、实验对照组和25、50、75 μg CFB-siRNA组,每组12只鼠24只眼.实验对照组和CFB-siRNA组大鼠用激光光凝法建立CNV模型,不同剂量CFB-siRNA组于激光光凝后第1、3、5天分别经鼠尾静脉注射相应剂量的CFB-siRNA;实验对照组大鼠以同样方法注射生理盐水,空白对照组大鼠不给予任何干预措施.各组大鼠分别于光凝后第3、7、14、21、28天进行荧光素眼底血管造影( FFA),根据荧光素渗漏程度对各光凝斑评分并检测CNV的生长情况；采用免疫组织化学法检测各组大鼠脉络膜内血管内皮生长因子(VEGF)、Ⅷ因子的表达情况.分别于第7、14、21、28天用免疫组织化学法检测脉络膜中CFB、VEGF、转化生长因子p2(TGF-β2)蛋白的表达,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法观察CFB与VEGFmRNA、TGF-β2mRNA表达的关系. 结果 不同剂量CFB-siRNA组的CNV发生率明显低于实验对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05)；75 μg CFB-siRNA治疗组CNV发生率明显低于25 μg CFB-siRNA组(P＜0 05).免疫组织化学检测结果显示,不同剂量CFB-siRNA组VEGF、Ⅷ因子在大鼠脉络膜中的表达较2个对照组均减弱,且75 μg CFB-siRNA组减弱程度高于25 μg CFB-siRNA组.光凝后14 ～ 21 d,各剂量CFB-siRNA组VEGF蛋白、Ⅷ因子和TGF-β2在脉络膜中的表达均低于空白对照组,各组总体比较差异有统计学意义(P＜0.05).光凝后7～21 d,不同剂量CFB-siRNA组的CFB在脉络膜中的表达明显低于空白对照组,各组总体比较差异均有统计学意义(P＜0.05).RT-PCR检测结果显示,实验对照组CFB表达持续增加,VEGF、TGF-β2呈曲线变化,21 d时为表达高峰；不同剂量CFB-siRNA组中CFB、VEGF、TGF-β2表达显著减少,差异均有统计学意义(P＜0.05). 结论 尾静脉注射CFB-siRNA能够有效抑制激光诱导的大鼠CNV生成,其抑制效果随着注射剂量的增加而增强.补体激活旁路途径在CNV生成中扮演着重要角色,抑制CFB可减少CNV生成中VEGF和TGF-β2的表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	马景学	河北医科大学第二医院眼科	148	640	11.0	18.0
2	杨爱琴	河北医科大学第二医院眼科	19	102	7.0	9.0
3	尚庆丽	河北医科大学第二医院眼科	23	79	6.0	8.0
4	修贺明	河北医科大学第二医院眼科	6	41	2.0	6.0
5	马诚	天津市第一中心医院眼科	5	4	2.0	2.0
6	高建	河北医科大学第二医院眼科	2	10	2.0	2.0
7	姚会娟	河北医科大学第二医院眼科	1	2	1.0	1.0