PTD-OD-HA融合蛋白对K562细胞中Bcr-Ab1的抑制作用观察

• 作者: 冯文莉 季茂胜 曾建明 李千音 高淼 黄世峰 黄峥兰
• 来源期刊: 解放军医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 白血病,髓样,慢性 蛋白转导域 融合蛋白质类,bcr-ab1
• 年，卷（期）: 2012,（10）
• 所属期刊栏目: 基础论著
• 页码范围: 951-954
• 分类号: R733.722
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨PTD-OD-HA融合蛋白转导K562细胞的动力学、定位及其与Bcr-Ab1定位的关系,以及对Bcr-Ab1寡聚化和Bcr-Ab1酪氨酸激酶活性的影响.方法 采用FITC标记PTD-OD-HA融合蛋白,观察蛋白转导K562细胞的效率与剂量和时间的关系,激光共聚焦显微镜检测融合蛋白在细胞内的定位,免疫共沉淀法检测融合蛋白与Bcr-Ab1的相互作用,Western blotting检测Bcr-Ab1的磷酸化水平.结果 PTD-OD-HA转导K562细胞呈剂量和时间依赖性.PTD-OD-HA定位于K562细胞胞质,与Bcr-Ab1共定位,且能与Bcr-Ab1蛋白相互作用,进而干扰Bcr-Ab1同源寡聚化,并可降低Bcr-Ab1的磷酸化水平.结论 在K562细胞中,PTD-OD-HA融合蛋白能有效抑制Bcr-Ab1同源寡聚化及磷酸化水平.