禽流感病毒NS1蛋白在杆状病毒表达系统中的表达

• 作者: 刘在斯 文辉强 李东卫 沈楠 焦同路 王世达 王靖飞 郭莹莹
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 禽流感病毒,NS1蛋白 杆状病毒表达载体系统 蛋白纯化
• 年，卷（期）: 2012,（6）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 27-31
• 分类号: S852.657
• 字数: 3683字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-5038.2012.06.006

摘要

为获得纯化的禽流感病毒(AIV)的NS1蛋白,将A/chicken/Guangxi/10/99(H9N2)( CK/GX/10/99) NS1全长核苷酸克隆至杆状病毒转移载体pFastBacHTA中,构建了重组转移载体pFastBacHTA-NS1,然后转化入DH10Bac感受态细胞中制备重组杆粒,在脂质体介导下转染sf9昆虫细胞,获得表达NS1基因的重组杆状病毒.用重组杆状病毒转染昆虫细胞sf9进行NS1蛋白的表达,通过SDS-PAGE电泳、Western blot、间接免疫荧光(IFA)对表达的目标蛋白进行分析.结果表明,构建了含NS1基因的重组杆状病毒,分子质量约30 ku的重组蛋白得到了表达,为NS1的相关功能研究奠定了基础.