TaqMan-MGB荧光定量PCR快速检测结核分枝杆菌katG基因突变

• 作者: 万康林 张媛媛 柳正卫 潘爱珍 王晓萌 赵秀芹
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 结核分枝杆菌 katG基因 TaqMan-MGB荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 14-18,23
• 分类号: R378.91
• 字数: 4517字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2012.01.004

摘要

目的 建立一种特异、灵敏、快速检测结核分枝杆菌katG基因突变的TaqMan-MGB荧光定量PCR方法.方法根据结核分枝杆菌katG基因315位点突变的特点,设计一对特异性TaqMan-MGB探针和引物,通过反应条件优化,建立荧光定量PCR方法；用克隆到PMD18-T载体上katG基因阳性标准品及不同菌株来评价该方法的特异性、敏感性和重复性.结果 灵敏度高,检测目的基因的最低检测下限10 copies/μL,比常规PCR灵敏高100倍；特异性高,检测16株非结核分枝杆菌标准株和7种常见呼吸道感染细菌的标准株均为阴性；与测序法相比,野生型和突变型探针的敏感性和特异性均为100％.重复性好,批内批间CT值变异系数均小于1％.结论 TaqMan-MGB荧光定量PCR的方法能特异、灵敏、快速检测结核杆菌菌株katG 315位点突变.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王晓萌		73	706	14.0	22.0
2	柳正卫		26	237	9.0	14.0