H9N2亚型猪流感病毒血凝素基因的表达及LAT诊断方法的研究

• 作者: 张瑞华 李春红 薛拥志 金梅林 陈焕春
• 来源期刊: 中国兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪流感病毒 血凝素基因 原核表达 乳胶凝集试验
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 所属期刊栏目: 人兽共患病
• 页码范围: 548-551
• 分类号: S852.65
• 语种: 中文

摘要

根据H9N2亚型猪流感病毒血凝素基因序列设计并合成引物,从本室分离保存的H9N2亚型猪流感病毒中扩增出血凝素基因,并将其克隆进pMD18-T载体,限制性酶切及序列测定后,进一步将其信号肽缺失并亚克隆到pGEX-KG中,使其在E.coli BL21（DE3）中与GST融合表达。SDS-PAGE显示表达的融合蛋白的相对分子质量约为90 000。Western印迹表明表达的蛋白质具有免疫学活性。表达产物位于包涵体中,包涵体经变性、复性处理,利用复性产物作为抗原,经碳二亚胺（EDAC）将表达产物和羧基化的乳胶共价偶联,建立了H9亚型猪流感病毒抗体的乳胶凝集试验的检测方法,结果表明,应用HA重组蛋白作为诊断抗原具有特异性强、敏感性高、重复性好的特点,可用于H9亚型猪流感抗体水平监测、流行病学调查和现地疫病普查。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈焕春	华中农业大学动物医学院动物病毒室	331	4866	36.0	53.0
2	金梅林	华中农业大学动物医学院动物病毒室	81	896	15.0	27.0
3	李春红	河北北方学院动物科技学院	37	99	6.0	8.0
4	张瑞华	河北北方学院动物科技学院	28	31	3.0	4.0
5	薛拥志	河北北方学院动物科技学院	16	56	5.0	7.0