转hTERT基因的山羊胎儿成纤维细胞的生物学特性及其表达分析

• 作者: 屈晓君 张拓 谢莹 赵晓娥 马保华
• 来源期刊: 中国兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 人端粒酶逆转录酶基因(hTERT) 永生化 山羊胎儿成纤维细胞
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 所属期刊栏目: 基础兽医学
• 页码范围: 586-591,605
• 分类号: S852.2
• 语种: 中文

摘要

用脂质体介导法将hTERT基因转染到山羊胎儿成纤维细胞中,以期获得永生化的山羊胎儿成纤维细胞系。对转染后的阳性细胞进行细胞学和分子学相关检测。结果显示,导入hTERT的阳性细胞形态正常,并已传至第58代;未转染组细胞经长期传代后（30代）,增殖缓慢,部分细胞表现衰老和凋亡的迹象。RT-PCR检测转染组细胞中有hTERT基因表达。生长曲线绘制结果显示转染组（30代和50代）山羊胎儿成纤维细胞生长速度稍快于未转染组（5代）细胞,但差异不显著（P〉0.05）。转染组细胞生长旺盛,细胞接种后第6天,基本覆盖培养孔。而未转染组（30代）细胞一直生长缓慢,差异显著（P〈0.05）。未转染组（30代）山羊胎儿成纤维细胞处于S期细胞和G1期细胞分别为28.9%和60.8%,而转染组（30代）分别为45.2%和45.0%。说明外源性hTERT基因可促进山羊胎儿成纤维细胞由G1期向S期转变,并提高细胞增殖能力。转染组（50代）山羊胎儿成纤维细胞染色体核型正常,未发生变化。未转染组（30代）细胞凋亡率和死亡率分别为39.7%和29.4%,而转染组（30代）分别为11.0%和12.7%,差异极显著（P〈0.01）。hTERT蛋白在转染组（30代）山羊胎儿成纤维细胞中表达,蛋白相对分子质量为127 000。说明外源性hTERT基因可以延长胎儿成纤维细胞在体外培养的寿命,降低细胞凋亡率。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张拓	西北农林科技大学动物医学院	4	11	2.0	3.0
2	马保华	西北农林科技大学动物医学院	52	240	7.0	12.0
3	赵晓娥	西北农林科技大学动物医学院	24	83	6.0	7.0
4	屈晓君	西北农林科技大学动物医学院	3	6	2.0	2.0
5	谢莹	西北农林科技大学动物医学院	1	3	1.0	1.0