猪内源性逆转录病毒透过生物人工肝的影响因素

• 作者: 丁义涛 张悦 施晓雷 檀家俊 肖江强 袁献温 韩冰 顾忠泽
• 来源期刊: 中华肝胆外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 猪内源性逆转录病毒 生物人工肝 病毒学安全性 膜孔径
• 年，卷（期）: 2012,（5）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 368-371
• 分类号: R-33
• 字数: 2867字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1007-8118.2012.05.015

摘要

目的 病毒安全性是猪源性生物人工肝(BAL)不可忽略的安全问题.本研究旨在探讨影响BAL中猪内源性逆转录病毒(PERV)透过的因素.方法 构建双循环的新型猪源性BAL.两循环间采用膜孔径为10 nm、20 nm、30 nm和35 nm的血浆成分分离柱以及500 nm膜孔径的血浆过滤柱分隔两循环.反应器内填充共培养的猪肝细胞-骨髓间充质肝细胞或原代猪肝细胞并连续循环72 h.每12 h抽取内、外循环内培养液检测PERV RNA、逆转录酶(RT)活性以及其体外感染性.结果 血浆过滤柱组中,内外循环内PERV检测结果完全相同,提示500 nm血浆滤过柱对PERV并无阻隔作用.在血浆成分交换柱各组中,各时间点内循环中均能检出RNA和RT活性,但是外循环中并未检出RT活性,而且随着膜孔径减小,RNA的检出时间逐渐延迟,且内循环RNA水平逐渐增加.各培养液均未发现能够体外感染HEK293细胞.结论 膜孔径、循环时间以及内循环病毒浓度是影响BAL中PERV透过的主要原因.