十二指肠钩虫谷胱甘肽转移酶AduGST-1基因的克隆和重组表达

• 作者: 何庆丰 彭礼飞 邓莉 邵正
• 来源期刊: 热带医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 十二指肠钩虫 谷胱甘肽转移酶 克隆 原核表达
• 年，卷（期）: 2012,（7）
• 所属期刊栏目: 实验研究论著
• 页码范围: 820-823
• 分类号: R383.13
• 语种: 中文

摘要

目的 克隆十二指肠钩虫谷胱甘肽转移酶(GST) AduGST-1基因,并在大肠埃希菌中表达获得重组AduGST-1.方法 设计特异引物,以十二肠钩虫成虫cDNA为模板,通过PCR扩增AduGST-1基因.将获得的AduGST-1编码序列克隆至原核表达载体pETHF,构建重组表达质粒pETHF/AduGST-1.重组质粒转化至大肠埃希菌BL21 (DE3),用IPTG诱导表达、Ni亲和层析分离纯化重组AduGST-1,SDS-PAGE分析重组蛋白表达及纯化情况.结果 成功扩增到AduGST-1全长编码序列,并登记到GenBank (accession no.JQ812812).AduGST-1编码序列长度为624 bp,编码307个氨基酸残基.成功构建了重组表达质粒pETHF/AduGST-1,在BL21(DE3)中表达并纯化了重组AduGST-1.结论 首次报道从十二指肠钩虫中分离到GST基因,该基因可在大肠埃希菌中高效表达,并分离纯化了重组GST蛋白,为进一步研究AduGST-1功能与应用奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	彭礼飞	广东医学院寄生虫学教研室	35	155	7.0	10.0
2	邓莉	广东医学院寄生虫学教研室	23	72	6.0	7.0
3	何庆丰	广东医学院寄生虫学教研室	13	48	5.0	6.0
4	邵正	广东医学院寄生虫学教研室	11	17	2.0	4.0