猪肺炎支原体P216基因片段的表达及黏附活性研究

• 作者: 冯志新 刘茂军 杜海霞 熊祺琰 王海燕 白方方 邵国青
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪肺炎支原体 P216基因片段 黏附活性
• 年，卷（期）: 2012,（8）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 1324-1329
• 分类号: S852.62
• 字数: 3574字
• 语种: 中文

摘要

本研究旨在研究猪肺炎支原体P216蛋白的黏附活性并初步建立猪肺炎支原体蛋白黏附模型.根据软件分析和文献报道从P216全基因中选取亲水性、抗原性、黏附性较好的目的片段,利用PCR从Mhp NJ株扩增P 216基因片段,克隆到表达载体pET-32a(+)中,获得重组质粒pET-32a(+ )/P216,经IPTG诱导获得重组蛋白,通过Western blot和间接免疫荧光试验检测重组蛋白的免疫原性及黏附活性.结果表明,PCR扩增的目的基因大小为1 636 bp;SDS-PAGE检测重组蛋白相对分子质量为80.1 ku;Western blot检测表明重组蛋白能与Mhp阳性血清发生特异性反应；间接免疫荧光试验表明该蛋白对猪肺炎支原体黏附SJPL细胞产生占位抑制作用.结果提示,P216蛋白具有良好的黏附活性,能黏附SJPL细胞,从而为猪肺炎支原体其他黏附因子的研究奠定基础.