乳铁蛋白基因启动子元件调控效应分析

• 作者: 于浩 刘松财 官员 张英 张鹏 房希碧 李明谦 许无恨 郝琳琳 金晶 马强
• 来源期刊: 中国兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 乳铁蛋白 稳定转染 调控元件
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 所属期刊栏目: 基础兽医学
• 页码范围: 573-576,582
• 分类号: S852.23
• 语种: 中文

摘要

本试验先后进行2轮载体构建及转染试验,对牛乳铁蛋白基因启动子元件调控效应进行了分析。首先进行第1轮载体构建及转染试验：采用PCR方法,利用4对引物从牛乳铁蛋白基因5′调控区-1 799向3′端依次缺失500bp进行调控序列扩增,将获得的扩增片段替换pEGFP-N1的CMV启动子,构建了4个重组载体,将重组载体转染牛乳腺上皮细胞（BMEC）,经筛选获得稳定的单克隆细胞,测定并比较各组细胞的荧光强度。在以上试验基础上,为进一步精确确定牛乳铁蛋白基因启动子顺式调控元件序列,进行第2轮载体构建及转染试验,方法同第1轮。结果表明,牛乳铁蛋白基因上游调控序列-1 323～-1 372存在负调控元件,-1 372～-1 560存在正调控元件。