小鼠外周组织时钟基因启动子区甲基化分析

• 作者: 左晓虹 林庆玲 蔡彦宁 袁艳鹏
• 来源期刊: 基础医学与临床
• 学科: 医学
• 关键词: 时钟基因 启动子 甲基化特异性PCR
• 年，卷（期）: 2012,（10）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 1118-1125
• 分类号: R34
• 字数: 1953字
• 语种: 中文

摘要

目的 应用一种简单快速经济的方法检测8个主要时钟基因PER1、PER2、CRY1、CRY2、CLOCK、NPAS2、BMAL1和BMAL2启动子区甲基化状态,检测小鼠外周组织肝、心、肾、胸腺、睾丸时钟基因启动子区甲基化状态.方法 用偏重亚硫酸氢钠和对苯二酚对基因组DNA进行修饰.修饰后的DNA为模板,两套不同的引物对:甲基化特异性引物对和非甲基化特异性引物对扩增小鼠肝、心、肾、胸腺、睾丸组织时钟基因启动子区.PCR产物进行电泳和测序.结果 扩增产物与预期片段大小相符合.PCR产物经过直接测序进一步证实小鼠外周组织时钟基因启动子区均为非甲基化状态.结论 建立了一种检测小鼠时钟基因启动子区甲基化的新方法,借此证明成年小鼠5个外周组织8个时钟基因启动子区均呈非甲基化状态.