三甲基化组蛋白H3赖氨酸4对调节性T淋巴细胞foxp3基因表达的影响

• 作者: 于艳辉 何敏 刘健胜 刘华 卢思广 李兴花 陈宁宁
• 来源期刊: 实用儿科临床杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 染色质免疫共沉淀 调节性T淋巴细胞 三甲基化组蛋白H3赖氨酸4
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 211-214
• 分类号: R729
• 字数: 3869字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1003-515X.2012.03.023

摘要

目的 探讨天然调节性T淋巴细胞(nTreg)的三甲基化组蛋白H3赖氨酸4(H3 K4me3)对foxp3基因的影响,寻找维持调节性T淋巴细胞(Treg)表型长期稳定的方法.方法 使用免疫磁珠细胞(MACS)分选法从健康人外周血中分离出CD4+ CD25+Treg.对CD4+ CD25+ Treg分别进行0d、3d、7d培养,其中0d为阴性对照组,3d为阳性组1,7d为阳性组2,采用流式细胞仪(FCM)对0d、3d、7 d nTreg膜表面标志CD25的变化进行检测,并分别对培养0d、3d、7d的nTreg细胞通过染色质免疫共沉淀(ChIP-PCR)法检测foxp3基因启动子区H3 K4 me3及DNA水平变化.结果 1.使用细胞计数Kit-8(CCK-8)法确定植物血凝素(PHA)质量浓度在10 mg·L-1时为最佳的药物质量浓度,对Treg细胞的增殖作用最为显著.nTreg细胞培养0d、3d、7d的表型变化呈递减趋势.随着培养时间(0d、3d、7 d)的延长,与foxp3基因启动子区结合的H3 K4 me3表达逐渐减少.2.采用ChIP-PCR法对培养0d、3d、7d的nTreg细胞检测与H3 K4 me3结合的foxp3基因启动子区DNA水平变化.DNA凝胶电泳图显示,0d、3d在204 bp处可见条带(灰度值分别为2.31、0.91),7d有模糊条带或无条带.三者比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 PHA不能维持Treg细胞的表型稳定,其机制与H3 K4 me3减少有关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	卢思广	徐州医学院附属连云港第一人民医院儿科	57	303	9.0	14.0
2	于艳辉	徐州医学院临床学院儿科系	5	18	3.0	4.0
3	刘健胜	徐州医学院附属连云港第一人民医院儿科	6	14	2.0	3.0
4	何敏	徐州医学院临床学院儿科系	4	4	1.0	1.0
5	陈宁宁	徐州医学院临床学院儿科系	2	7	1.0	2.0
6	李兴花	徐州医学院临床学院儿科系	2	3	1.0	1.0
7	刘华	徐州医学院临床学院儿科系	3	67	1.0	3.0