农杆菌介导尖孢镰刀菌西瓜专化型转化体系的建立及突变体筛选

• 作者: 全鑫 孙虎 常高正 徐小利 李晓慧 杨丽荣 杨帆 梁慎 薛保国 赵卫星
• 来源期刊: 河南农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 尖孢镰刀菌西瓜专化型 农杆菌 T-DNA插入转化 转化效率
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 植物保护
• 页码范围: 82-86
• 分类号: S476
• 字数: 4164字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-3268.2012.01.021

摘要

以尖孢镰刀菌西瓜专化型(Fusarium oxysporum f.sp.niveum)FO-11-06菌株为受体,采用农杆菌介导的遗传转化方法,实现了农杆菌AGL1(含pATMT1)介导的西瓜枯萎病菌的转化,并研究了转化介质和pH值对转化效率的影响.结果表明:在25℃下,采用乙酰丁香酮(AS)浓度为200 μmol/L、农杆菌OD600=0.15、尖孢镰刀菌分生孢子含量为1×106个/mL、pH值为5.1～5.8时可实现T-DNA的插入转化.当转化体系pH值为5.3时,转化效率最高,达到每106个分生孢子产生553个转化子.不同共转化介质对转化效率影响明显,玻璃纸和硝酸纤维素滤膜转化效率较高,每106个分生孢子获得551个和549个转化子,显著高于滤纸.通过转化,获得尖孢镰刀菌西瓜专化型转化子1 989个,对生长速度、菌落颜色和产孢量等性状进行分析,发现有46个性状特异的突变体.研究结果为进一步研究尖孢镰刀菌西瓜专化型的生长发育、致病机制和相关基因的功能奠定了基础.