博尔纳病病毒核蛋白调控神经干细胞存活增殖及ERK1/2信号通路的实验研究

• 作者: DJUNG Lilya Wati 刘霞 张亮 杨柳 王啸 王明菊 谢鹏 黄荣忠
• 来源期刊: 中国微生态学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 博尔纳病病毒 核蛋白 神经干细胞 存活 增殖 分化 ERK1/2
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 204-210
• 分类号: R74
• 语种: 中文

摘要

目的 观察博尔纳病病毒核蛋白(Borna disease virus p40,BDV p40)对大鼠海马源性神经干细胞(Neural stem cells,NSCs)增殖、存活、分化及ERK1/2信号通路的影响,揭示BDV引起神经精神疾病的部分发病机制.方法 (1)分别用pEGFP-N1-p40及pEGFP-N1质粒转染NSCs,观察转染效率并鉴定BDV p40在NSCs中的表达.(2)实验设置3组:未转染组、pEGFP-N1空转对照组及pEGFP-N1 -p40转染组,用CCK-8试剂盒、BrdU摄入实验及免疫组化分别检测细胞存活、增殖及分化为神经元、星型胶质细胞、少突胶质细胞的比例的变化,并经Western Blot检测ERK1/2磷酸化的改变.结果 (1)成功建立表达BDV p40的NSCs模型；PCR结果显示只有pEGFP-N1 -p40转染组细胞有BDV p40基因表达.(2) BDV p40抑制NSCs的存活、增殖,但对于转染后贴壁分化14 d时3组细胞分化为神经元、星型胶质细胞、少突胶质细胞的比例未见显著差异.Western Blot结果显示BDV p40下调了磷酸化ERK1/2在蛋白水平的表达.结论 BDV p40抑制NSCs的存活、增殖,但是对NSCs的分化方向没有明显的影响.BDV p40有可能通过下调磷酸化ERK1/2活性对NSCs的存活、增殖起抑制作用.