PTEN 通过拮抗 PI3K/Akt 信号通路抑制神经干细胞增殖

• 作者: 叶建新 崔晓萍 林敏 林航 王魁花 穆军山 陈建梅
• 来源期刊: 西安交通大学学报（医学版）
• 关键词: 神经干细胞 PTEN PI3K/Akt 信号通路 低氧 bad 海马
• 年，卷（期）: 2016,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 239-243,272
• 页数: 6页
• 分类号: R741.05
• 语种: 中文
• DOI: 10.7652/jdyxb201602019

摘要

目的：探讨 PTEN 抑制神经干细胞增殖的作用,以阐明是否可以通过抑制 PTEN 蛋白表达来促进神经干细胞增殖。方法取新生24 h 昆明小鼠海马组织,分离培养原代神经干细胞,并采用免疫荧光检测鉴定；将所培养的传代神经干细胞随机分组：正常组、缺血模型组、低氧组(低氧+缺血模型组)、Lip2000组(低氧+缺血模型组+Lip2000空转染组)、PTEN 转染组(低氧+缺血模型组+Ad5-PTEN 转染组)、PTEN 干扰组(低氧+缺血模型组+ Lip2000+PTENsiRNA 干扰组),检测0、6、24、36、48 h 不同时间点各组神经干细胞的增殖情况,同时检测 PTEN 转染后 PTEN蛋白在各组神经干细胞的表达情况,以及对 PI3K-Akt 信号通路上标志性蛋白表达的影响。结果免疫荧光检测Nestin 以鉴定神经干细胞球,在荧光显微镜下观察到绿色明亮且典型的细胞球,球内可见清晰结构。MTT 测定发现低氧组、Lip2000组培养36 h 时神经干细胞出现明显增殖,与模型组、PTEN 转染组及 PTEN 干扰组相比,差异有统计学意义(P <0.05),其中 PTEN 干扰组的细胞增殖又较模型组、PTEN 转染组明显,差异亦有统计学意义(P <0.05)；与正常组细胞比较,模型组与 PTEN 转染组的 PTEN 表达升高(P <0.05),且均较正常组降低(P <0.05),其中低氧组、Lip2000组与 PTEN 干扰组降低的趋势相当(P >0.05)。PTEN 质粒转染后各组总的 Akt 和 bad 未出现明显变化,但是与正常组比较,模型组与 PTEN 转染组的 PI3K、p-Akt、p-bad 表达降低(P <0.05),其中 PTEN 转染组的变化较为明显。低氧组、Lip2000组与 PTEN 干扰组的 PI3K、p-Akt、p-bad 表达升高(P <0.05)。结论低氧有助于促进神经干细胞增殖,PTEN 对 PI3K/Akt 的抑制作用可能是成体神经干细胞增殖受阻的关键因素。