不同温度、时间、IPTG和菌种浓度对丁肝抗原蛋白表达量的影响

• 作者: 丁军颖 伊瑶 卢学新 毕胜利 田瑞光 苏秋东 邱丰
• 来源期刊: 医学研究杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 丁肝 基因工程 抗原 表达
• 年，卷（期）: 2012,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 31-34
• 分类号: R339.5
• 字数: 2781字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-548X.2012.05.011

摘要

目的 确定以大肠杆菌表达丁肝抗原的最佳条件,为规模生产以求研发丁肝ELISA诊断试剂奠定基础.方法 在不同温度、时间、IPTG和菌种浓度条件下,分别进行蛋白表达,取等体积样本进行SDS - PAGE电泳,经Image Lab软件分析,比较目的蛋白表达量,确定最佳表达条件.结果 在25℃、29℃、33℃和37℃条件下,蛋白表达量无统计意义的差别；在添加IPTG后的1、2、3、4、5和6h,表达量无统计意义的差别；在以0.25、0.5、1、2和4mmol/L IPTG诱导时,表达量无统计意义的差别.当添加诱导剂前,菌种的OD600值分别为1.236、0.772、0.542和0.384,目的蛋白表达量有显著意义的差别.以OD600值为1.236和0.772时,表达量最高,两者之间无统计意义的差别；OD600值为0.542时,表达量次之；OD600值为0.384时,表达量最低.结论 温度、表达时间和IPTG浓度在一定范围内对丁肝抗原蛋白表达量无影响；菌种的浓度是影响蛋白表达量的决定性因素；当菌种浓度在OD600值约为0.7～1.2时,以0.25mmolL IPTG在37℃,诱导表达1h为最佳表达条件.该条件下,目的蛋白表达量占菌体总蛋白的41.5％.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	丁军颖	中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所	6	14	1.0	3.0
2	邱丰	中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所	16	38	4.0	5.0
3	苏秋东	中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所	13	29	2.0	5.0
4	卢学新	中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所	11	26	2.0	5.0
5	伊瑶	中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所	30	83	5.0	8.0
6	田瑞光	中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所	11	40	5.0	6.0