葡萄赤霉素合成相关基因克隆、亚细胞定位和表达分析

• 作者: 任国慧 刘洪 吴伟民 房经贵 李阿英 王西成 赵密珍
• 来源期刊: 中国农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 葡萄 赤霉素 亚细胞定位 荧光定量RT-PCR 基因表达分析
• 年，卷（期）: 2012,（11）
• 所属期刊栏目: 园艺
• 页码范围: 2224-2231
• 分类号: S663.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2012.11.011

摘要

[目的]分离和克隆‘藤稔’葡萄内根-贝壳杉烯氧化酶基因(VvKO)、GA2-氧化酶基因(VvGA2ox2和VvGA2ox4)、GA3β-羟化酶基因(VvGA3ox4)和GA20-氧化酶基因(VvGA20ox1)等5个重要赤霉素合成相关基因的ORF序列,并对其进行亚细胞定位与表达分析.[方法]采用电子克隆方法克隆相关基因,构建亚细胞定位表达载体,基因枪转化洋葱表皮细胞后激光共聚焦显微镜下观察.并用半定量和荧光定量RT-PCR方法研究各基因的时空表达.[结果]成功克隆了5个基因的完整ORF序列,对上述基因在葡萄不同组织器官中的表达水平进行分析发现,它们在组织器官间的表达有强弱差异.其中,VvGA2ox2主要在果实中表达,VvGA2ox4主要在叶片和果实中表达,而VvKO、VvGA3ox4和VvGA20ox1则在花、叶片和果实中均有一定的表达.VvKO、VvGA2ox2、VvGA2ox4和VvGA3ox4与GFP融合蛋白仅在核内产生绿色荧光；而VvGA20oxl与GFP融合蛋白在细胞核和细胞质膜上均产生绿色荧光信号.[结论]克隆的5个基因与葡萄的花、果实以及营养器官的发育存在不同程度的联系,其中4个基因仅呈现出细胞核内作用的特点,而VvGA20ox1则表现出细胞核和细胞质膜定位的现象.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵密珍	江苏省农业科学院园艺研究所	123	1382	20.0	32.0
2	吴伟民	江苏省农业科学院园艺研究所	85	595	14.0	19.0
3	房经贵	南京农业大学园艺学院	194	3087	29.0	47.0
4	王西成	江苏省农业科学院园艺研究所	14	170	8.0	13.0
6	刘洪	南京农业大学园艺学院	8	151	5.0	8.0
9	任国慧	南京农业大学园艺学院	8	71	4.0	8.0
10	李阿英	南京农业大学园艺学院	3	33	2.0	3.0