H5亚型AIV HA抗原表位重组蛋白McAbs的制备及应用

• 作者: 刘加波 庞耀珊 范晴 谢丽基 谢志勤 谢芝勋 邓显文
• 来源期刊: 中国动物检疫
• 学科: 农学
• 关键词: 禽流感病毒(AIV) H5N1亚型 抗原表位 单克隆抗体(McAbs)
• 年，卷（期）: 2012,（10）
• 页码范围: 34-39
• 分类号: S852.659.5
• 字数: 4426字
• 语种: 中文

摘要

目的以H5亚型禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)的血凝素(HA)抗原表位重组表达蛋白为抗原,探索H5亚型AIV单克隆抗体制备的简便有效途径.方法利用H5亚型AIV的HA抗原表位原核表达重组蛋白为抗原,4次免疫8~10周龄雌性BALB/c小鼠后,取小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,用间接ELISA方法筛选能分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株,并对单克隆抗体的特性及初步应用价值进行测试.结果得到一株能稳定分泌针对H5亚型AIV HA抗原表位的特异性单克隆抗体杂交瘤细胞株,单克隆抗体ELISA效价达1:5×104,为具有IgK轻链的IgM亚类.该单克隆抗体能特异性地与H5亚型AIV产生肉眼可见的WesternBlot免疫印迹反应,与其它供试的禽病抗原无反应.H5N1亚型AIV阳性血清能有效阻断辣根过氧化酶标记的单克隆抗体与HA抗原表位重组蛋白的结合.结论本研究探索出一条利用H5亚型AIV的HA抗原表位重组表达蛋白为抗原的单克隆抗体制备的简便、高效途径,所制备的单克隆抗体稳定性好、效价高、特异性强,在H5亚型禽流感病毒及其血清学检测中有较高的应用价值.