四环素调控系统在肿瘤细胞株中的建立和鉴定

• 作者: 刘长庭 常德 李开龙 潘春晓 由磊
• 来源期刊: 军医进修学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: 基因表达调控 癌症 四环素 基因功能
• 年，卷（期）: 2012,（9）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 968-971
• 分类号: R73.3
• 字数: 3611字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-1139.2012.09.026

摘要

目的 建立受四环素及其衍生物强力霉素(doxycycline,DOX) 诱导调控的高表达外源目的 基因的人胰腺癌细胞株.方法 构建高效表达转录激活因子(tTA) 的真核表达载体,利用脂质体转染法导入人胰腺癌细胞株PANC-1,经嘌呤霉素筛选后挑取单克隆扩大培养,利用荧光素酶报告基因系统筛选受强力霉素诱导调控的高表达外源目的 基因的PANC-1 细胞株(Tetoff细胞株),并利用RT-PCR 和免疫荧光细胞化学法检测tTA 在Tet-off 细胞株中的表达.结果 荧光素酶报告基因技术、RTPCR和免疫荧光化学染色法检测均表明成功构建了三株受强力霉素高度调控的高表达低背景的PANC-1 细胞株.结论 成功获得含四环素调控系统的Tet-off 人胰腺癌细胞株,其调控活性好、背景低,为研究外源基因功能提供了一条有效途径.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘长庭	解放军总医院南楼呼吸科	200	1379	18.0	26.0
2	由磊	北京协和医院基本外科	3	7	1.0	2.0
3	常德	解放军总医院南楼呼吸科	7	5	2.0	2.0
7	李开龙	北京协和医学院基础学院中国医学科学院基础医学研究所病理系	2	0	0.0	0.0
8	潘春晓	北京协和医学院基础学院中国医学科学院基础医学研究所病理系	2	0	0.0	0.0