草鱼点状产气单胞菌单克隆抗体的制备与双抗原夹心ELISA法的建立

• 作者: 康洁 马丽
• 来源期刊: 贵州农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 草鱼 点状产气单胞菌 单克隆抗体 双抗原夹心ELISA
• 年，卷（期）: 2012,（5）
• 所属期刊栏目: 畜牧·兽医·水产·蚕
• 页码范围: 138-141
• 分类号: S965.112
• 字数: 4744字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-3601.2012.05.037

摘要

为了建立一种快速、准确能早期检测草鱼肠炎痛原菌的方法,以患病草鱼为材料,制备点状产气单胞菌单克隆抗体(McAb),并鉴定其特异性和抗原表位；采用过碘酸钠方法,以辣根过氧化物酶标记单抗,用试管凝集试验测定其活性；建立点状产气单胞菌McAb的双抗原夹心ELISA检测方法,确定包被单抗和酶标单抗的浓度,并测定其灵敏度和特异性.结果:1)获得了2株特异性强和抗原表位不同的单抗,其ELISA效价为1:16000.2)辣根过氧化物酶标记的抗体活性为1:640.3)建立了包被抗体稀释度为1:800、酶标抗体稀释度为1:1600的双抗原夹心ELISA检测方法,该方法与点状产气单胞菌呈强阳性反应,与近似菌无交叉反应,灵敏性为7×103fu/mL.结论:制备的点状产气单胞菌McAb的效价高、特异性强；建立的双抗原夹心ELISA方法操作简单、灵敏度高、特异性强,可应用于草鱼肠炎病原体的早期快速检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	康洁	商丘师范学院生命科学系	56	238	10.0	13.0
2	马丽	商丘师范学院生命科学系	23	82	6.0	7.0