烟草IMP分子标记体系的建立与优化

• 作者: 卢秀萍 宋中邦 桂毅杰 樊龙江 肖炳光 谢贺 高玉龙
• 来源期刊: 中国农学通报
• 学科: 农学
• 关键词: IMP分子标记 烟草 PCR反应体系
• 年，卷（期）: 2012,（31）
• 所属期刊栏目: 园艺—研究报告
• 页码范围: 131-136
• 页数: 6页
• 分类号: S572
• 字数: 3250字
• 语种: 中文

摘要

为满足烟草遗传分析的需求,建立稳定的IMP标记扩增方法,对IMP分子标记体系进行了优化.以烟草DNA为模板,利用Li-cor 4300凝胶分离系统,优化了模板、Mg2+、dNTP、聚合酶浓度等IRD荧光引物扩增反应体系主要参数,建立分析IMP标记的平台.结果显示,影响烟草荧光引物扩增反应最大的因素是dNTPs和引物浓度,反应体系对Mg2+浓度的要求较宽泛,同时,不同的引物对各因素的浓度要求也有差异.最终确定20μL反应体系中,模板DNA 70 ng,Mg2+浓度2.0mmol/L,dNTPs为0.2mmol/L,rTaq DNA聚合酶1.5U,引物浓度均为1μmol/L.该体系扩增条带稳定,重复性好,适合烟草遗传多样性分析.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	樊龙江	浙江大学农业与生物技术学院	27	721	17.0	26.0
2	卢秀萍		117	1429	22.0	32.0
3	肖炳光		82	826	15.0	23.0
4	高玉龙		19	123	8.0	10.0
5	桂毅杰	浙江大学农业与生物技术学院	5	47	3.0	5.0
6	谢贺		10	12	3.0	3.0
7	宋中邦		10	19	3.0	4.0