E.coli DH10B碱性磷酸酶基因的克隆、表达及活性研究

• 作者: 姚雪梅 李军 陈雪芬 黄霞 齐兴柱
• 来源期刊: 中国医药导报
• 学科: 生物学
• 关键词: 碱性磷酸酶 大肠杆菌DH10B 表达纯化 活性分析
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 短篇论著
• 页码范围: 28-29,66
• 分类号: Q78
• 字数: 3134字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-7210.2012.01.009

摘要

目的:克隆并表达E.coli DH10B碱性磷酸酶(AKP)成熟肽基因(phoAm),为AKP的定向改构及应用奠定基础.方法:采用PCR法从E.coli DH10B基因组扩增phoAm;将phoAm克隆入表达载体pET28a,再转入E.coli BL21(DE3)进行表达;用免疫金层析法和SDS-PAGE法检测表达的重组rAKP;采用对硝基酚磷酸(pNPP)法测定rAKP的活性.结果:rAKP单体分子量约47 K,活性分析比对照菌提高21.5倍.结论:获得AKP成熟肽基因并得了到具有较高活性的重组rAKP.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	齐兴柱	海南大学海洋学院	16	38	3.0	5.0
2	陈雪芬	海南大学海洋学院	31	299	9.0	16.0
3	姚雪梅	海南大学海洋学院	18	227	8.0	14.0
4	李军		21	100	6.0	9.0
6	黄霞	海南大学海洋学院	9	9	2.0	2.0