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白细胞分化抗原14稳定过表达SGC-7901细胞株的建立及其凋亡
白细胞分化抗原14稳定过表达SGC-7901细胞株的建立及其凋亡
作者:
旦增
旺加
李康
王中华
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
胃癌
CD14
载体构建
稳定转染
凋亡
摘要:
目的 构建白细胞分化抗原14(CD14)真核表达载体,建立重组质粒转染的胃癌SGC-7901细胞系,筛选并鉴定CD14稳定表达的细胞株并初步探讨CD14对胃癌细胞凋亡的影响.方法 利用PCR扩增人CD14编码区序列,使用基因重组技术将其克隆至真核表达载体pcDNA3.1-EGFP中,得到重组表达质粒pc DNA3.1-EGFP-CD14.双酶切及测序鉴定后,利用脂质体法将其转入人胃癌SGC-7901细胞中;G418筛选得到稳定转染细胞系;RT-PCR及Western blot鉴定转染前后CD14的表达;Hoechst染色检测细胞凋亡情况.结果 从胃癌SGC-7901细胞中成功克隆了CD14编码区;经双酶切及测序鉴定,pcDNA3.1-EGFP-CD14载体构建成功;成功筛选出CD14稳转细胞系,其mRNA表达量为未转染组的2.61倍(P<0.01),蛋白表达量为未转染组的1.88倍(P<0.01).Hoechst33258染色结果显示CD14稳定转染组出现了明显的细胞凋亡.结论 成功构建了CD14过表达载体,并获得了CD14稳定过表达的胃癌SGC-7901细胞株,CD14能够促进胃癌细胞的凋亡.
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文献信息
篇名
白细胞分化抗原14稳定过表达SGC-7901细胞株的建立及其凋亡
来源期刊
广东医学
学科
关键词
胃癌
CD14
载体构建
稳定转染
凋亡
年,卷(期)
2013,(22)
所属期刊栏目
基础研究
研究方向
页码范围
3389-3392
页数
4页
分类号
字数
4086字
语种
中文
DOI
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作者信息
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姓名
单位
发文数
被引次数
H指数
G指数
1
旦增
西藏自治区人民医院内四科
67
162
7.0
11.0
2
旺加
西藏自治区人民医院内四科
30
17
2.0
3.0
3
王中华
西藏自治区人民医院内四科
23
48
4.0
6.0
4
李康
西藏自治区人民医院内四科
27
92
5.0
9.0
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CD14
载体构建
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研究来源
研究分支
研究去脉
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期刊影响力
广东医学
主办单位:
广东省医学学术交流中心(广东省医学情报研究所)
出版周期:
半月刊
ISSN:
1001-9448
CN:
44-1192/R
开本:
大16开
出版地:
广州市越秀区惠福西路进步里2号之6
邮发代号:
46-66
创刊时间:
1963
语种:
chi
出版文献量(篇)
26055
总下载数(次)
22
总被引数(次)
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