RNAi沉默PELPI/MNAR基因对子宫内膜癌细胞增殖和细胞周期的作用

• 作者: 万璟 李小毛
• 来源期刊: 中山大学学报（医学科学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 子宫内膜癌 RNA干扰 脯氨酸-谷氨酸-亮氨酸富集蛋白1/雌激素受体非基因组活性辅助调节因子 慢病毒
• 年，卷（期）: 2013,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 811-818
• 页数: 8页
• 分类号: R73
• 字数: 4984字
• 语种: 中文

摘要

[目的]构建脯氨酸-谷氨酸-亮氨酸富集蛋白1 (PELP1)基因慢病毒表达载体,研究沉默PELP1/雌激素受体非基因组活性辅助调节因子(PELP1/MNAR)基因表达对子宫内膜癌细胞增殖和周期的作用及机制.[方法]构建合成靶向PELP1/MNAR RNAi慢病毒表达载体,并转染子宫内膜癌Ishikawa细胞,Real-time PCR和western blot检测PELP1/MNARmRNA和蛋白水平的表达.使用普通培养基和加入E2的培养基培养各组细胞,MTT检测各组细胞增殖情况;流式细胞仪检测细胞生长周期情况;Western blot检测ER下游靶基因c-fos,cyclin D1的蛋白表达水平.[结果]成功构建合成靶向PELP1/MNAR RNAi慢病毒表达载体,转染子宫内膜癌Ishikawa细胞,转染后PELP1/MNAR mRNA的表达和蛋白的表达分别下降86％和65％(P＜ 0.05).转染后Ishikawa细胞与对照组相比增殖抑制(P＜0.05),细胞周期G0/G1期细胞比例增加,S期细胞比例减少(P＜ 0.05).加入雌激素后,三组细胞的生长速度加快,细胞S期的比例增加,转染组增殖抑制明显(P＜0.05),S期比例降低(P＜ 0.05).转染组ER下游基因c-fos、cyclin-D1蛋白水平均显著降低(P＜0.05).[结论]在子宫内膜癌细胞中沉默PELP1/MNAR的表达能能抑制细胞生长、使细胞阻滞在G1期,下调ER靶基因蛋白表达,PELP1/MNAR有望成为子宫内膜癌治疗的潜在靶点.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李小毛	中山大学附属第三医院妇科	322	2116	21.0	31.0
2	万璟	中山大学附属第三医院妇科	35	216	8.0	14.0