干扰ALDH1A1表达的shRNA载体成功转染宫颈癌HeLa细胞及意义

• 作者: 刘龙阳 周晖 姚婷婷 张丙忠 彭永排 易娟娟 林仲秋 陈勍
• 来源期刊: 国际妇产科学杂志
• 关键词: ALDH1A1 RNA,小分子干扰 转染 HeLa细胞
• 年，卷（期）: 2013,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 176-178,186,封3
• 页数: 5页
• 字数: 2912字
• 语种: 中文

摘要

目的:采用shRNA转染构建干扰乙醛脱氢酶-1(ALDH1A1)表达的宫颈癌HeLa细胞,以进一步探讨ALDH1A1与宫颈癌细胞的生物学特性之间的关系.方法:体外培养宫颈癌HeLa细胞,加入梯度浓度G418溶液进行筛选,确定最佳筛选浓度；取对数生长期细胞,采用Lipofectamine 2000脂质体将4种干扰重组质粒(ALDH1A1-1719、ALDH1A1-574、ALDH1A1-740、ALDH1A1-921,其中有一种具最佳干扰效果)及1种阴性对照质粒(shNC)转染宫颈癌HeLa细胞.5种重组质粒与Lipofectamine 2000脂质体的比例均为0.2 μg:1 μL,空白对照组中仅加入Lipofectamine 2000脂质体.6h后换液,24h后荧光显微镜下观察荧光表达情况.结果:确定G418的最佳筛选浓度为400 mg/L；5种重组质粒均成功转染人HeLa细胞中.其中ALDH1A1-1719的转染效率为4.67％;ALDH1A1-574的转染效率为1.16％；ALDH1A1-740的转染效率为12.45％；ALDH1A1-921的转染效率为3.42％；shNC组的转染效率为1.02％.结论:干扰ALDH1A1表达的shRNA载体转染宫颈腺癌HeLa细胞成功可行且效果好.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	彭永排	中山大学孙逸仙纪念医院妇科肿瘤科	30	272	10.0	16.0
2	张丙忠	中山大学孙逸仙纪念医院妇科肿瘤科	44	229	9.0	13.0
3	陈勍	中山大学孙逸仙纪念医院妇科肿瘤科	63	429	11.0	17.0
4	周晖	中山大学孙逸仙纪念医院妇科肿瘤科	130	1057	18.0	28.0
5	姚婷婷	中山大学孙逸仙纪念医院妇科肿瘤科	30	151	6.0	11.0
6	刘龙阳	中山大学孙逸仙纪念医院妇科肿瘤科	6	8	2.0	2.0
7	易娟娟	中山大学孙逸仙纪念医院皮肤性病科	2	4	1.0	2.0