Annexin A2的表达上调及其23位酪氨酸磷酸化促进乳腺癌细胞MCF-7的增殖和侵袭

• 作者: 刘媛 孙秀梅 张飞 牛瑞芳 王宇晴 王智勇 田然
• 来源期刊: 天津医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: Annexin A2 定点突变 慢病毒载体 MCF-7细胞 增殖 侵袭
• 年，卷（期）: 2013,（1）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 1-5
• 页数: 5页
• 分类号: R730.231|R737.9
• 字数: 3401字
• 语种: 中文

摘要

目的:构建以慢病毒质粒pCDH为载体的人Annexin A2(Anxa2)基因及其不同活性状态的突变体的重组质粒,筛选并验证稳定表达目的基因的人乳腺癌细胞MCF-7,观察不同表达水平及不同的酪氨酸磷酸化状态下Anxa2对乳腺癌细胞MCF-7增殖及侵袭能力的影响.方法:以质粒pEGFP-N3-Anxa2为模板,利用PCR定点突变技术获得Anxa2基因的不同活性状态的突变体—pEGFP-N3-Anxa2Y23A和pEGFP-N3-Anxa2Y23D.以慢病毒质粒pCDH和pEGFP-N3-Anxa2及其突变体为模板,通过亚克隆技术获得重组质粒pCDH-EGFP-Anxa2WT、pCDH-EGFP-Anxa2Y23A及pCDH-EGFP-Anxa2Y23D.利用慢病毒感染获得稳定表达Anxa2及其突变体的MCF-7细胞.分别采用MTT和克隆形成、划痕和transwell法测定MCF-7的增殖、迁移和侵袭能力.结果:表达Anxa2-WT及Anxa2-Y23D蛋白的MCF-7细胞的增殖、迁移及侵袭能力明显提高.结论:Anxa2的表达上调及其23位酪氨酸的磷酸化促进乳腺癌细胞MCF-7的增殖及侵袭.