IL-4、IL-13蛋白表达及抗IL-4、IL-13人源单链抗体的筛选

• 作者: 叶迎春 年四季 袁青 郭夕源 黄黎
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: IL-4 IL-13 人源单链抗体 筛选
• 年，卷（期）: 2013,（6）
• 所属期刊栏目: 免疫学技术与方法
• 页码范围: 644-648
• 页数: 5页
• 分类号: R392.11
• 字数: 3710字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2013.06.019

摘要

目的:表达IL-4和IL-13蛋白,从人源单链抗体文库中分别筛选抗IL-4和抗IL-13单链抗体.方法:采用RT-PCR从健康志愿者外周血单核细胞(PBMC) mRNA中扩增IL-4和IL-13 cDNA;构建硫氧还蛋白融合表达载体,转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达并对表达产物进行纯化鉴定.以生物素化的IL-4和IL-13为抗原从前期构建的人源抗体文库中采用噬菌体展示技术分别筛选抗IL-4和抗IL-13人源单链抗体(scFv).结果:扩增的IL-4 cDNA大小为280 bp,表达的融合蛋白大小为27 kD左右.扩增的IL-13 cDNA大小为252 bp,表达的融合蛋白大小为25 kD左右.分别以生物素化的IL-4和IL-13蛋白为抗原,采用噬菌体展示技术对人源抗体文库进行3轮富集后,分别有大约37％的scFvs与IL-4有结合特性,有约27％的scFvs与IL-13有结合特性.筛选了4株分别与IL-4和IL-13结合能力强的单链抗体进行了Westem blot鉴定和测序.结论:成功筛选到抗IL-4和抗IL-13人源性单链抗体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄黎	泸州医学院基础医学院	29	98	6.0	8.0
2	叶迎春	泸州医学院基础医学院	25	114	6.0	9.0
3	年四季	泸州医学院基础医学院	12	50	4.0	6.0
4	袁青	泸州医学院基础医学院	15	54	5.0	6.0
5	郭夕源	泸州医学院基础医学院	4	14	3.0	3.0