双分子荧光互补系统的构建及其在病毒学中的初步应用

• 作者: 张荣 童光志 袁世山 陈春燕 韦祖樟
• 来源期刊: 中国动物传染病学报
• 学科: 农学
• 关键词: 双分子荧光互补 荧光蛋白 蛋白质相互作用
• 年，卷（期）: 2013,（3）
• 页码范围: 27-32
• 页数: 6页
• 分类号: S852.659.6
• 字数: 3040字
• 语种: 中文

摘要

双分子荧光互补（bimolecular fluorescence complementation，BiFC）是新近发展起来的研究蛋白质相互作用的技术，因其使用简便、检测灵敏、可在生理条件下直接观察，已在生物各领域广泛应用。本试验将黄色荧光蛋白 EYFP 突变为 Venus，并在第173位氨基酸后分割为两段失去活性的 VN 和 VC，经共转染表达不会产生荧光；在插入已被证明存在相互作用的猪繁殖与呼吸综合征病毒（Porcine reproductive and respiratory syndrome virus ，PRRSV）的核衣壳（nucleocapsid，N）蛋白经共转染表达时，可以观察到荧光；通过扩增 MARC-145细胞的细胞骨架蛋白α-tubulin 并插入到 VN 和 VC，除与自身共表达时发出荧光外，与 N 蛋白共表达时没有荧光产生，说明该 VN 和 VC 片段用于研究蛋白互作是可靠的。本试验建立了 BiFC 系统，为以后应用到研究病毒编码蛋白之间及其与宿主蛋白间的相互作用奠定基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	童光志	中国农业科学院上海兽医研究所	168	2158	24.0	40.0
2	袁世山	中国农业科学院上海兽医研究所	33	152	8.0	10.0
3	张荣	中国农业科学院上海兽医研究所	10	177	3.0	10.0
4	韦祖樟	中国农业科学院上海兽医研究所	11	35	4.0	5.0
5	陈春燕	中国农业科学院上海兽医研究所	2	10	1.0	2.0