一种带有组氨酸标签的抗糖尿病疫苗的构建、表达、纯化及鉴定

• 作者: 刘晓锐 刘景晶 吴洁 徐茂磊 杨雪 邢芸 金亮
• 来源期刊: 药物生物技术
• 学科: 医学
• 关键词: 疫苗 Ⅰ型糖尿病 大肠杆菌 重组表达 His-Hsp65-6p277融合蛋白 分离纯化 组氨酸标签
• 年，卷（期）: 2013,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 189-193
• 页数: 5页
• 分类号: R587.1
• 语种: 中文

摘要

利用组氨酸标签系统提高抗糖尿病疫苗HSP65-6P277融合蛋白的产量,简化纯化工艺.通过PCR方法,在融合蛋白HSP65-6P277的N端添加6个组氨酸标签后,定向克隆到pET28a原核表达载体中成功构建了组氨酸标签融合表达载体pET28a-HIS-HSP65-6P277.通过乳糖诱导,融合蛋白HIS-HSP65-6P277在大肠杆菌BL21 (DE3)宿主中以可溶形式表达,镍柱亲和层析纯化后,经SDS-PAGE和Western blotting鉴定表明表达产物是约70 k具有6个组氨酸标签肽的融合蛋白；分离纯化融合蛋白的时间从原来的15 ～20 d缩短为2～3d,产量提高到56 mg/L.组氨酸标签系统可以较好的简化抗糖尿病疫苗HSP65-6P277融合蛋白的纯化工艺,提高产量.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘景晶		116	553	12.0	18.0
2	吴洁		53	285	6.0	16.0
3	金亮		32	25	3.0	3.0
4	杨雪		22	15	1.0	3.0
5	邢芸		13	15	2.0	3.0
6	刘晓锐		2	0	0.0	0.0
7	徐茂磊		3	0	0.0	0.0