双荧光素酶标记丙型肝炎病毒亚基因组复制子细胞模型的建立

• 作者: 付秋霞 周欠欠 彭剑淳 樊炜 王怡 詹林盛 贾帅争 高博
• 来源期刊: 军事医学
• 学科: 医学
• 关键词: 丙型肝炎病毒 荧光素酶类 萤火虫 Gaussia荧光素酶 细胞模型 复制子
• 年，卷（期）: 2013,（9）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 681-684,691
• 页数: 5页
• 分类号: R373.21
• 字数: 3424字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7644/j.issn.1674-9960.2013.09.011

摘要

目的 构建双荧光素酶标记丙型肝炎病毒(HCV)亚基因组复制子细胞模型,为HCV研究提供有效工具.方法 通过单克隆筛选及慢病毒感染构建双荧光素酶标记的HCV亚基因组复制子细胞模型(HCV Fluc-Ubi-Gluc).利用荧光素酶检测、Western印迹检测鉴定细胞模型,利用IFN-α对HCV抗病毒效果评价验证细胞模型的有效性.结果 筛选所得HCV亚基因组细胞克隆检测到荧光素酶活性,Western 印迹检测到HCV NS5A蛋白表达.NS3/4A对黄色荧光蛋白(YFP)标记的MAVS(YFP-MAVS)切割作用使亚细胞定位发生转移.IFN-α处理后荧光素酶活性、HCV蛋白表达水平明显降低.结论 该模型采用萤火虫荧光素酶报告基因指示HCV亚基因组在细胞内的复制水平,Gaussia荧光素酶指示细胞的生长数量,能准确反映候选药物对HCV复制水平的影响,并有效排除药物的细胞毒性干扰,具有操作简单、快速等优点,在抗病毒药物高通量筛选、HCV致病机制等研究方面具有一定的价值.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	贾帅争	军事医学科学院野战输血研究所	25	78	5.0	7.0
2	詹林盛	军事医学科学院野战输血研究所	64	450	11.0	19.0
3	彭剑淳	军事医学科学院野战输血研究所	23	345	8.0	18.0
4	付秋霞	军事医学科学院野战输血研究所	12	32	3.0	5.0
5	樊炜	军事医学科学院野战输血研究所	4	6	2.0	2.0
6	王怡	军事医学科学院野战输血研究所	13	49	3.0	6.0
7	高博	军事医学科学院野战输血研究所	11	28	3.0	4.0
8	周欠欠	军事医学科学院野战输血研究所	5	13	2.0	3.0