甲型副伤寒杆菌pagC基因分布及其重组表达产物免疫保护作用

• 作者: 严杰 孙爱华 张佳 范欣丽 葛玉梅
• 来源期刊: 浙江大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 沙门菌,甲型副伤寒/免疫学 沙门菌,甲型副伤寒/遗传学 基因表达调控,细菌 重组,遗传 基因表达 pagC基因 重组表达 免疫原性 免疫保护性
• 年，卷（期）: 2013,（2）
• 所属期刊栏目: 专题报道
• 页码范围: 171-176,213
• 页数: 7页
• 分类号: R378.24
• 字数: 4325字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3785/j.issn.1008-9292.2013.02.007

摘要

目的:了解甲型副伤寒沙门菌临床菌株pagC基因携带率及序列保守性,确定甲型副伤寒沙门菌pagC基因原核重组表达产物rPagC免疫原性和保护作用.方法:采用PCR及其产物测序了解甲型副伤寒沙门菌临床菌株pagC基因携带率及序列保守性.构建甲型副伤寒沙门菌PagC基因原核表达系统,Ni-NTA亲和层析法提纯表达的rPagC.采用SDS-PAGE和BioRad凝胶图象分析系统检测rPagC表达情况及其产量.采用免疫扩散法、ELISA和Western Blot鉴定其抗原性和免疫反应性.采用小鼠感染模型了解rPagC对甲型副伤寒杆菌感染的免疫保护效果,微量肥达试验检测rPagC免疫小鼠血清凝集伤寒和副伤寒沙门菌的效果.结果:所有被检测的甲型副伤寒沙门菌临床菌株均携带pagC基因,其核苷酸和氨基酸序列相似性分别高达99.1％ ～100％和98.4％～100％.所构建的原核表达系统能高效表达rPagC.rPagC免疫家兔可产生高效价抗体并能与甲型副伤寒杆菌全菌抗血清产生阳性Western杂交信号.ELISA结果显示,97.1％(66/68)甲型副伤寒患者血清标本rPagC抗体阳性.100 μg和200 μg rPagC对感染小鼠的免疫保护率分别为73.3％(11/15)和86.7％(13/15).rPagC免疫小鼠血清对甲型副伤寒沙门菌和伤寒沙门菌H抗原凝集效价高达1:10～1:40.结论:pagC基因在甲型副伤寒沙门菌株中分布广泛.rPagC有良好的免疫原性及较强的免疫保护作用,可作为甲型副伤寒杆菌基因工程疫苗候选抗原

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙爱华	温州医学院检验医学院和生命科学学院	112	523	11.0	15.0
3	严杰	浙江大学医学院病原生物学系	265	1149	14.0	20.0
4	张佳	温州医学院检验医学院和生命科学学院	9	36	4.0	5.0
6	葛玉梅	浙江大学医学院病原生物学系	11	50	5.0	6.0
11	范欣丽		1	5	1.0	1.0