甲型副伤寒沙门菌ompN基因原核表达系统构建及其产物免疫保护作用

• 作者: 孙爱华 林旭瑷 胡玮琳 葛玉梅 金蕾
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 甲型副伤寒沙门菌 ompN基因 重组表达 抗原性 免疫保护性
• 年，卷（期）: 2015,（8）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 709-713
• 页数: 5页
• 分类号: R378
• 字数: 3943字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/cjz.j.issn.1002-2694.2015.08.005

摘要

目的 了解甲型副伤寒沙门菌外膜蛋白ompN基因携带率及其重组表达产物抗原性和免疫保护作用.方法 采用PCR扩增甲型副伤寒沙门菌参考标准株50001及126株临床菌株ompN基因并测序.构建ompN基因原核表达系统,Ni-NTA亲和层析法提取目的重组蛋白rOmpN.采用家兔免疫法和ELISA检测rOmpN免疫原性.微量肥达试验和激光共聚焦显微镜法分别检测OmpN在甲型副伤寒沙门菌株中表达率及其膜定位.采用小鼠感染模型了解rOmpN对甲型副伤寒沙门菌致死性感染的免疫保护作用.结果 所有甲型副伤寒沙门菌株中均扩增出全长ompN基因片段,其核苷酸和氨基酸序列相似性分别高达98.6％～99.9％和98.7％～100％.OmpN是甲型副伤寒沙门茵跨膜蛋白.ompN基因表达系统能表达rOmpN,免疫家兔后能产生高效价抗血清.98.2％(55/56)甲型副伤寒病人血清标本中rOmpN-IgG阳性,rOmpN兔抗血清能有效凝集甲型副伤寒沙门菌.100和200 μg rOmpN对感染小鼠的免疫保护率分别为60.0％(9/15)和73.3％(11/15).结论 甲型副伤寒沙门菌ompN基因分布广泛且序列保守,rOmpN有较强的抗原性和免疫保护作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙爱华	浙江医学高等专科学校基础医学部	112	523	11.0	15.0
2	金蕾	浙江大学医学院病原生物学系	7	47	3.0	6.0
3	林旭瑷	浙江大学医学院病原生物学系	28	47	4.0	5.0
4	胡玮琳	浙江大学医学院病原生物学系	13	17	3.0	4.0
5	葛玉梅	浙江大学医学院病原生物学系	11	50	5.0	6.0