过表达miR-128a抑制大鼠前体脂肪细胞分化

• 作者: 仇杨 何晶晶 刘帅 孙世铎 宁小敏 李艳杰 杨公社 程佳 董培越
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 关键词: miR-128a 大鼠前体脂肪细胞 过表达
• 年，卷（期）: 2013,（4）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 388-395
• 页数: 8页
• 字数: 5946字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2013.04.002

摘要

为阐明miR-128a在大鼠前体脂肪细胞分化过程中的功能,本实验检测了大鼠(Rattus norvegicus)前体脂肪细胞成脂分化过程中miR-128a的表达,明确其在分化过程中的表达趋势；构建miR-128a的腺病毒过表达载体并侵染大鼠前体脂肪细胞,随后采用Real-time PCR和Western blot分别在mRNA和蛋白水平检测了成脂标记基因过氧化物酶体增生物激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptor gamma,PPARγ)和脂肪酸结合蛋白2(adipocyte protein 2,aP2)的表达；过表达miR-128a的大鼠前体脂肪细胞在第10天进行油红O染色,从形态学上观察成脂分化情况.结果显示,miR-128a的表达量在脂肪细胞诱导分化第二天降到最低点,随后维持在第0天的水平.在过表达miR-128a后,大鼠前体脂肪细胞成脂标记基因PPARγ和aP2的蛋白表达量与对照相比显著下降,脂滴明显少于对照组.实验结果表明:在大鼠前体脂肪细胞中过表达miR-128a能够抑制前体脂肪细胞的分化；并且通过PPARγ mRNA和蛋白水平的差异性变化,结合miRNA的作用机理,推测PPARγ有可能是miR-128a的靶基因.本实验也为研究miR-128a在脂肪细胞分化中发挥作用的机理提供了理论基础.