白念珠菌SPE1基因高表达菌株构建及鉴定

• 作者: 姚响文 姜远英 曹颖瑛 赵柳娅 颜钰 鹿辉
• 来源期刊: 中国真菌学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 白念珠菌 SPE1 高表达
• 年，卷（期）: 2013,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 198-201
• 页数: 4页
• 分类号: R379.4
• 字数: 3259字
• 语种: 中文

摘要

目的 构建白念珠菌SPE1基因高表达菌株.方法 将白念珠菌SPE1基因的ORF置于高表达质粒载体pCaE-XP的MET3启动子后面,构建pCaEXP-SPE1的高表达质粒,然后采用醋酸锂转染法将高表达质粒转染白念珠菌RM1000中,在SD-ura-met-cys-选择性固体培养基上筛选阳性克隆,抽取基因组进行PCR验证,将验证为阳性转染子的菌落采用RealTime RT-PCR方法进行SPE1基因转录水平的表达验证.结果 通过酶切鉴定pCaEXP-SPE1高表达质粒构建正确；通过PCR验证表明SPE1基因整合到亲本菌中的RP10位点；通过Real Time RT-PCR方法筛选出SPE1基因在转录水平高表达的菌株.结论 利用高表达质粒载体pCaEXP通过基因同源重组等方法正确构建SPE1基因高表达的白念珠菌.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	姜远英	第二军医大学药学院新药研究中心	190	1570	18.0	30.0
2	曹颖瑛	第二军医大学药学院新药研究中心	37	251	8.0	14.0
3	姚响文	第二军医大学药学院新药研究中心	4	29	4.0	4.0
4	赵柳娅	第二军医大学药学院新药研究中心	3	19	2.0	3.0
5	颜钰	第二军医大学药学院新药研究中心	2	11	2.0	2.0
6	鹿辉	第二军医大学药学院新药研究中心	2	5	1.0	2.0