慢病毒载体介导人sTRAIL对胃癌SGC-7901细胞凋亡的诱导作用

• 作者: 刘玲 吴克俭 曹江 朱祖安 李莉 费素娟
• 来源期刊: 四川大学学报（医学版）
• 关键词: 慢病毒载体 可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 基因治疗
• 年，卷（期）: 2013,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 348-351,392
• 语种: 中文

摘要

目的 构建携带人可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(sTRAIL)基因的自身失活型慢病毒载体,观察sTRAIL对人胃癌SGC-7901细胞的诱导凋亡作用,探讨其基因治疗功效.方法 构建含人sTRAIL基因及内部核糖体进入位点序列(IRES)和绿色荧光蛋白(GFP)基因的双顺反子慢病毒载体.采用脂质体转染法将慢病毒三质粒包装系统包装出的携带人sTRAIL的重组慢病毒,在体外感染人胃癌SGC-7901细胞、正常人肝细胞HL-7702、人胚肺成纤维细胞HLF-1.应用流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡率,酶联免疫吸附实验(ELISA)评价sTRA IL蛋白在胃癌细胞中的表达.结果 成功构建了慢病毒表达质粒pXZ208-sTRAIL,包装的重组慢病毒滴度可达106 IU/mL,可有效感染体外培养的细胞；含sTRAIL的重组慢病毒感染SGC-7901细胞,细胞凋亡率随病毒感染复数(MOI)的增加而升高,呈剂量依赖性；在MOI为6.0、作用24 h时,细胞凋亡率最高,可达(29.12±2.87)％,细胞上清中sTRAIL表达量为(34.08±3.43) ng/mL；而在HL-7702、HLF-1等人正常细胞未见明显细胞凋亡.结论 含有sTRAIL基因的重组慢病毒载体在体外能够有效地感染胃癌SGC-7901细胞并使其分泌有生物活性的sTRAIL蛋白,可诱导SGC-7901细胞的凋亡,而对正常细胞无显著影响.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	费素娟	徐州医学院附属医院消化科	88	451	12.0	15.0
2	吴克俭	徐州医学院附属医院消化科	30	203	10.0	13.0
3	刘玲	徐州医学院附属医院消化科	39	145	6.0	9.0
4	曹江	徐州医学院附属医院血液科	31	131	5.0	10.0
5	李莉	徐州医学院附属医院消化科	28	121	6.0	10.0
6	朱祖安	徐州医学院附属医院消化科	32	127	6.0	9.0