不同血清浓度对bFGF联合EGF诱导BMSCs向神经细胞分化的影响

• 作者: 何丁文 刘玉亮 梁广胜 殷嫦嫦 殷明 罗元一
• 来源期刊: 神经解剖学杂志
• 关键词: 碱性成纤维生长因子 表皮生长因子 胎牛血清 BMSCs 神经细胞分化
• 年，卷（期）: 2013,（1）
• 所属期刊栏目: 原著
• 页码范围: 18-24
• 语种: 中文

摘要

目的:探讨不同血清浓度条件下碱性成纤维生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)联合表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)诱导骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)向神经细胞分化方向的影响.方法:全骨髓贴壁法体外分离培养BMSCs,流式细胞法检测BMSCs表面骨髓基质标志CD90和造血细胞标志CD45,MTT法绘制第3(P3)代BMSCs生长曲线.取P4代细胞分为3组给予不同诱导条件,分别给予含20 ng/ml的bFGF和20 ng/ml EGF的无胎牛血清(A组)、10 ml/L胎牛血清(B组)及100 ml/L胎牛血清(C组)的DMEM/F-12培养液进行诱导,倒置显微镜观察细胞的形态变化,诱导6d时免疫组织化学法检测细胞内神经元特异性烯醇化酶(NSE)及胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达,台盼蓝染色检测各组细胞的活力.结果:BM-SCs经3-4次传代培养后形态大致呈单一的长梭形或扁平形,流式细胞鉴定显示CD90阳性,CD45阴性；细胞生长曲线近似呈“S”形;诱导后可见细胞胞体收缩,呈双极、多极并伸出突起；诱导6d时3组活细胞率分别为:86.57％、95.29％、97.32％；免疫组化各组均见NSE、GFAP表达,3组NSE阳性率高于GFAP,A组NSE阳性率高于B、C组,差异具有统计学意义(P＜0.01),C组NSE阳性率高于B组,差异具有统计学意义(P＜0.01),A组GFAP阳性率低于B、C组,差异具有统计学意义(P＜0.01),C组GFAP阳性率高于B组,差异具有统计学意义(P＜0.01).结论:bFGF联合EGF可诱导BMSCs向神经细胞分化,在无血清条件下趋向于向神经元分化,在高浓度血清条件下趋向胶质细胞分化.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	殷明	南昌大学第二附属医院骨一科	73	325	10.0	13.0
2	殷嫦嫦	九江学院分析与检测实验室	69	228	8.0	10.0
3	何丁文	南昌大学第二附属医院骨一科	20	127	7.0	10.0
7	罗元一	南昌大学第二附属医院骨一科	5	18	2.0	4.0
11	刘玉亮	南昌大学第二附属医院骨一科	7	39	4.0	6.0