下调GnTⅣa表达对肝癌Hca-F细胞增殖及侵袭的影响

• 作者: 于生金 何静娜 张嘉宁 樊建慧 汪淑晶 郑伟龙
• 来源期刊: 中国肿瘤生物治疗杂志
• 学科: 医学
• 关键词: N-乙酰氨基葡萄糖转移酶Ⅳa 肝癌 增殖 Hca-F细胞 侵袭 慢病毒 RNAi
• 年，卷（期）: 2013,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 673-678
• 分类号: R735.7|R730.54
• 语种: 中文
• DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2013.06.007

摘要

目的:探讨慢病毒介导的N-乙酰氨基葡萄糖转移酶Ⅳa(N-acetylglucosaminyltransferaseⅣa,GnTⅣa)表达下调对小鼠肝癌Hca-F细胞体外增殖及侵袭能力的影响.方法:针对GnTⅣa的编码基因Mgat4a,构建含shRNA干扰序列的慢病毒表达载体pll3.7/Mgat4a-shRNA并包装慢病毒颗粒,感染Hca-F细胞.RT-PCR及流式细胞术分别检测Mgat4a-shRNA重组慢病毒感染对Hca-F细胞Mgat4a mRNA及GnTⅣa表达的影响,CCK-8法和Transwell侵袭实验分别检测Mgat4a-shRNA重组慢病毒感染在体外对Hca-F细胞增殖和侵袭能力的影响.结果:慢病毒能够高效感染小鼠肝癌细胞Hca-F,Mgat4a-shRNA组感染效率达72％.与Hca-F细胞和Mock-shRNA组相比,Mgat4a-shRNA组细胞内Mgat4a mRNA[(0.53±0.2)vs(2.97±0.2)、(2.90±0.1);均P＜0.05]和GnTⅣa[(47.80 ±2.25)vs(394.61 ±5.27)、(378.61±4.38);均P＜0.05]表达显著降低;增殖能力[细胞增殖抑制率:(46.9±0.02)％vs (0.82±0.03)％、0,P＜0.01]和体外侵袭能力[穿过滤膜的细胞数:(18±3)vs (42±4)、(38±3)个,均P＜0.05]显著下降.结论:慢病毒介导shRNA下调GnTⅣa的表达能够抑制小鼠肝癌细胞Hca-F的增殖及体外侵袭.