b型流感嗜血杆菌D蛋白原核可溶性表达研究

• 作者: 寸怡娜 尹梦梦 廖国阳 普元倩 杨景然 汤洋 苏秋东 贾志远 郭敏卓
• 来源期刊: 中华实验和临床病毒学杂志
• 关键词: 蛋白质 表达的序列标 嗜血菌,流感,b型
• 年，卷（期）: 2013,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 89-91
• 页数: 3页
• 字数: 2398字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1003-9279.2013.02.003

摘要

目的 通过原核表达系统可溶性表达重组D蛋白,为多糖结合疫苗的制备提供蛋白载体.方法 将Hib CMCC株基因组DNA中去除信号肽的hpd基因片段插入pET43.1a表达质粒,转化入感受态大肠埃希菌BL21 (DE3),IPTG诱导表达.表达的重组蛋白,经过硫酸铵沉淀和DEAE阴离子交换柱层析纯化后,用Western Blot的方法鉴定其免疫反应原性.结果 表达的重组蛋白以可溶性形式存在,表达量约占菌株总蛋白的44％,经过初步纯化后的重组蛋白可以和Hib抗血清发生特异性反应.结论 成功构建了D蛋白重组表达质粒,并在原核细胞中以可溶性形式表达出具有良好免疫反应原性的D蛋白.