干涉Gankyrin基因表达对小鼠乳腺癌转移的影响

• 作者: 巩伟丽 满江红 王少鑫 靳宝锋 韩秋影
• 来源期刊: 中华医学杂志
• 关键词: 慢病毒感染 肿瘤转移 Gankyrin
• 年，卷（期）: 2013,（14）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1099-1103
• 页数: 5页
• 字数: 4835字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0376-2491.2013.14.016

摘要

目的 建立稳定干涉癌基因Gankyrin的4T1-luc细胞株,探讨Gankyrin对小鼠乳腺癌转移的影响.方法 采用慢病毒感染和抗性筛选方法获得稳定干涉Gankyrin的乳腺癌细胞株4T1-luc/shGankyrin,通过蛋白质印迹和实时定量PCR方法分别在蛋白质和mRNA水平检测Gankyrin的干涉效果；选用BALB/c小鼠进行4T1细胞原位种植,利用活体成像技术实时观测小鼠体内肿瘤生长和肿瘤转移情况,并对小鼠肺转移瘤进行病理学分析.结果 采用免疫印迹和实时定量PCR,检测稳定敲低Gankyrin 4T1细胞在蛋白质水平和mRNA水平的表达,均明显低于对照细胞,与对照细胞相比,不同干涉序列的4T1细胞mRNA水平分别为对照细胞的4.9％、25.1％、69.8％.利用活体成像进行细胞数与细胞发光强度的检测,选择细胞数与发光强度基本一致的#2细胞株进行小鼠原位种植,其产生的转移瘤进行实时观测,结果显示敲低Gankyrin的4T1细胞诱导的肺转移瘤荧光强度为3.02×106,而对照细胞为10.9×106,同时病理学证实了对照细胞产生的肺转移瘤免疫组织化学Gankyrin染色阳性,而敲低Gankyrin的4T1细胞的肺转移瘤免疫组织化学Gankyrin染色阴性.结论 采用慢病毒感染的方法可以有效建立稳定敲低Gankyrin表达的细胞株；Gankyrin稳定干涉后对小鼠乳腺癌转移具有明显的抑制作用.Gankyrin有可能成为新的肿瘤治疗靶点.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	靳宝锋	军事医学科学院国家生物医学分析中心	9	69	4.0	8.0
2	巩伟丽	军事医学科学院国家生物医学分析中心	6	25	3.0	4.0
3	韩秋影	军事医学科学院国家生物医学分析中心	3	7	2.0	2.0
4	满江红	军事医学科学院国家生物医学分析中心	6	4	1.0	2.0
5	王少鑫	军事医学科学院国家生物医学分析中心	1	3	1.0	1.0