蔊菜病毒诱导基因沉默体系构建

• 作者: 张怡 徐克东 曹鹏 李成伟 李豪 杨松 韦丹丹 魏森
• 来源期刊: 华北农学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 病毒诱导的基因沉默 蔊菜 CLA基因 烟草脆裂病毒
• 年，卷（期）: 2013,（6）
• 页码范围: 65-70
• 页数: 6页
• 分类号: Q78
• 字数: 4718字
• 语种: 中文

摘要

构建蔊菜的病毒诱导基因沉默（ Virus induced gene silencing ，VIGS）体系，旨在建立蔊菜的快速基因功能验证的方法。通过RT-PCR扩增出棉花、大豆、拟南芥的1-脱氧木酮糖-5-磷酸合成酶（Cloroplasto alterados，CLA）基因片段，并将其分别构建到烟草脆裂病毒（ Tobacco rattle virus ，TRV）介导的VIGS载体，通过农杆菌GV3101侵染蔊菜并观察蔊菜的表型变化。结果显示，3种不同的CLA基因所侵染的蔊菜均出现不同程度的白化现象，半定量RT-PCR检测显示CLA的mRNA被显著降解，表明成功构建了蔊菜的VIGS体系。