桑树PDS基因VIGS转化体系的构建与鉴定

• 作者: 夏家凤 李瑞雪 汪泰初 王钰婷 胡飞 赵卫国
• 来源期刊: 南方农业学报
• 关键词: 桑树 八氢番茄红素脱氢酶(PDS) 病毒诱导的基因沉默(VIGS) 烟草脆裂病毒(TRV) 白化表型
• 年，卷（期）: 2018,（7）
• 所属期刊栏目: 畜牧·兽医·水产·蚕桑
• 页码范围: 1432-1438
• 页数: 7页
• 分类号: S888.3
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-1191.2018.07.26

摘要

[目的]建立桑树的病毒诱导基因沉默(VIGS)转化体系,为桑树功能基因的分析研究提供技术支持.[方法]以丰驰桑为试验材料,克隆含BamH I和Xba I酶切位点的八氢番茄红素脱氢酶(PDS)基因片段,经Xba I和BamH I双酶切后与烟草脆裂病毒(TRV)连接构建重组病毒载体pTRV2-PDS,转化农杆菌GV3101后通过压迫注射方式侵染桑树幼苗叶片.[结果]克隆获得的桑树PDS基因干扰片段346 bp,与改造后的TRV质粒连接可成功构建携带桑树PDS基因的重组病毒载体pTRV2-PDS.桑树叶片被侵染15 d后,接种重组病毒载体pTRV2-PDS桑树的第二轮真叶开始出现叶片白化现象,侵染20 d后,白化现象沿叶脉向四周逐渐扩散,叶片呈现明显的白化表型.实时荧光定量PCR检测结果显示,重组病毒载体pTRV2-PDS侵染的桑叶PDS基因相对表达量仅为阴性对照(pTRV2)的58％,二者差异极显著(P<0.01),表明桑树PDS基因表达被有效抑制.[结论]利用TRV构建的桑树VIGS体系能有效沉默PDS基因,使桑树叶片呈现明显的白化症状,即可用于后续的桑树功能基因鉴定.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵卫国		27	192	8.0	13.0
2	李瑞雪	安徽省农业科学院蚕桑研究所	29	102	5.0	9.0
4	汪泰初	安徽省农业科学院蚕桑研究所	50	312	9.0	16.0
5	王钰婷	安徽省农业科学院蚕桑研究所	16	34	4.0	4.0
6	胡飞	安徽省农业科学院植物保护与农产品质量安全研究所	29	91	6.0	7.0
7	夏家凤	安徽省农业科学院蚕桑研究所	14	25	4.0	4.0