非标记探针高分辨率熔解曲线技术检测HBV P区rt204位点耐药突变

• 作者: 毛雄英 王卫华 陈洁 陈辉
• 来源期刊: 中华临床感染病杂志
• 关键词: 肝炎病毒,乙型 高分辨率熔解 非标记探针 聚合酶链反应 突变 rt204位点
• 年，卷（期）: 2013,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 200-204
• 页数: 5页
• 字数: 4026字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1674-2397.2013.04.003

摘要

目的 建立一种基于非标记探针高分辨率熔解曲线技术(HRM)检测HBV P区rt204位点耐药突变的方法.方法 构建野生株rt204M、突变株rt204I和rt204V的质粒,设计、优化探针.利用质粒作为标准品建立HRM特征性解链图谱.收集2010年5月至2012年5月宁波大学附属医院诊治的185例慢性乙型肝炎患者外周血样本共185份,用HRM技术检测所有样本,并与特征性解链图谱比对,筛选出rt204位点的突变,再经基因测序验证.采用配对x2检验比较两种方法的变异检出率.结果 突变株rt204I、rt204V和野生株rt204M的熔解温度(Tm)分别为58.0℃、60.6℃和62.5℃；185份样本中,HRM技术成功分析168份(90.8％),基因测序成功分析155份(83.8％),二者差异有统计学意义(P＜0.01)；同时被两种方法检出的155份临床样本中,非标记探针HRM技术检测到野生株75份(rt204M),变异株80份(55份rt204I、25份rt204V),变异检出率为51.6％(80/155)；基因测序法检测到野生株110份(rt204M),变异株45份(30份rt204I、15份rt204V),变异检出率为29.0％ (45/155),两种方法差异有统计学意义(P＜0.01).结论 非标记探针HRM技术是一种简单、灵敏、快速、特异的HBV P区rt204位点耐药突变检测方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈洁	宁波大学医学院附属医院检验科	39	269	8.0	15.0
2	王卫华	宁波大学医学院附属医院检验科	44	221	9.0	13.0
3	陈辉		3	2	1.0	1.0
4	毛雄英		3	5	1.0	2.0