酵母双杂交筛选灰飞虱体内水稻黑条矮缩病毒 p10的互作蛋白

• 作者: 倪海平 周益军 张金凤 徐秋芳 李硕 陈晴晴
• 来源期刊: 中国水稻科学
• 学科: 农学
• 关键词: 水稻黑条矮缩病毒 外壳蛋白 互作蛋白 酵母双杂交
• 年，卷（期）: 2013,（6）
• 页码范围: 633-638
• 页数: 6页
• 分类号: S435.112+.3|S435.111.4+9
• 字数: 4787字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-7216.2013.06.010

摘要

为获取灰飞虱体内传播 RBSDV相关介体因子,以 RBSDV编码的外层外壳蛋白 p10为诱饵,采用酵母双杂交方法从灰飞虱 cDNA文库中筛选与 RBSDV p10互作的蛋白.将 RBSDV p10基因构建至 pGBKT7载体获得诱饵表达载体 pG-BKT7-p10.自激活实验结果表明,p10蛋白对酵母细胞无毒性,也不具有自激活活性.通过 pGADT7-cDNA 文库质粒转化含有 pGBKT7-p10的酵母 AH109筛选获得灰飞虱 cDNA文库中与 p10互作的蛋白.文库筛选共获得326个阳性克隆.测序结果表明这些阳性克隆编码14种不同的互作蛋白,包括Actin 1,GAPDH,RACK等.这些互作蛋白参与胞吞胞吐作用和膜融合等过程,可能与病毒在介体内的循回和增殖相关.